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01月09日

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

作者 : admin | 分类 : 生物医学 | 超过 8 人围观 | 已有 0 人发表了看法
原标题:Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Gibco ExpiCHO stable production medium (以下简称ExpiCHO SPM) 稳定生产型培养基沿用Gibco AGT 专利技术,它是一种无蛋白质、无水解物、无生长因子、无任何动物来源成分的一款化学成分限定的培养基,ExpiCHO SPM支持从瞬转到稳转的简单过渡,提供细胞高表达量而不需要额外的培养基优化,既可以作为单克隆培养基,提高单克隆的形成率,也适应于所有CHO细胞的大规模批量培养。

目前ExpiCHO SPM 培养基已成功应用于生物制药领域中CHO 细胞的大规模批量培养,ExpiCHO SPM适用于不同的CHO 细胞类型,如Horizon HD-BioP3 CHO-K1 Lonza s CHOK1SV GS-KO, CHO-S 等细胞系。

Case #1 ExpiCHO SPM Horizon HD-BioP3 某克隆细胞系上的应用

细胞系:Horizon HD-BioP3;

培养基:Gibco ExpiCHO SPM Gibco Dynamis Medium A Feed A ( 来自供应商C)

培养方式:Batch & Fed-batch

实验结果分析:

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Fig 1, Horizon HD-BioP3细胞在batch实验中的生长曲线

由图1 可以得知,在Batch 实验中,Horizon HD-BioP3 细胞在ExpiCHO SPM Dynamis 两种培养基中的细胞密度最高分别可达13.2*10 6 cells/ml 13.8*10 6 cells/ml ,细胞活率在第6 天时均大于98%

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

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Fig 2, Horizon HD-BioP3细胞在fed-batch实验中的生长曲线

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Fig 3,不同培养基条件下D14的titer

由图2 可以得知,细胞在Dynamis + Feed A ExpiCHO SPM + Feed A 培养基中组合培养基中的细胞生长都很好,细胞密度最高分别可达38.6*10 6 cells/mL 37.9*10 6 cells/mL, 而在Medium A+ feed A 的细胞生长略逊于Dynamis + Feed A ExpiCHO SPM + Feed A ;从细胞表达产量看(Fig 3 ),细胞在ExpiCHO SPM+ Feed A D14 titer 最高,其值为4191mg/L, Dynamis+ Feed A 组的titer 高了27% ,比Medium A + Feed A titer 高了76.3% ;这说明ExpiCHO SPM 在提升蛋白表达方面有着明显的优势。

Case# 2, ExpiCHOSPM CHO-K1 细胞系上的应用

细胞:CHO-K1 来源ATCC

培养方式:Fed-batch

培养基:ExpiCHO SPM Medium A Feed A (来自供应商C ,

补糖策略:低于4g/L 时补至6g/L

实验结果分析:

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Fig 4, 细胞生长曲线

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Fig 5, 细胞蛋白表达Titer

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Fig 6,细胞培养过程中代谢参数

由图4-6 可以得知,CHO-K1 细胞株在Expi CHO 中的细胞生长,蛋白产量和代谢参数与Medium A 相比都更优异,其中,与Medium A 相比,提前两天达到最高细胞密度,最高细胞密度为18.8*10 6 ,较Medium A 36% D14 titer 7.046g/L ,比在Medium A 中的提高了约10% 此外,细胞在ExpiCHO SPM 培养基中的乳酸代谢含量可以控制在很低的水平(小于0.2g/L , 可以使细胞处于一个比较良好的生长环境中。

Case#3 ExpiCHO SPM 在某CHO-S 细胞系表达融合蛋白的应用

细胞株:ExpiCHO-S

培养方式:Batch

培养基:ExpiCHO SPM ExpiCHO expression medium CD CHO medium Medium A/B/C/D/E/F (来自不同的供应商)

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Fig 7, 细胞在不同培养基中的细胞密度和活率

Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Fig 8 ,细胞在不同培养基中的蛋白表达

由图7 和图8 可知,在Batch 实验中,相较其它培养基而言,该细胞在ExpiCHO SPM 中的细胞表现最好,titer 可达1.348g/L

通过以上3 个案例说明,ExpiCHO SPM 培养基在细胞生长和细胞蛋白表达方面都有着优异的表现。此外,它在用于培养Lonza CHOK1SV GS-KO 细胞系时,还可以缩短细胞的倍增时间,提升抗体产物的质量(如可降低双抗分子的错配率等)。总之,ExpiCHO SPM 是一款适用于CHO 细胞大规模培养的高表达的性能优良的培养基,可以有效地赋能CHO 细胞生产高表达高质量的蛋白产物。

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